METODO PARA LA OBTENCION DE UNA PROTEINA RECOMBINANTE Y SU UTILIZACION EN LA DETECCION DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (VPPA).
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Inventors:
- CARLOS LOPEZ OTIN
- PEREZ FREIJE, JOSE, MARIA FACULTAD DE MEDICINA
- VINUELA DIAZ, ELADIO INSTIT.DE BIOLOGIA MOLECULAR
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Universidad de Oviedo
info
Universidad de Oviedo
Oviedo, España
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Consejo Superior de Investigaciones Científicas
info
Consejo Superior de Investigaciones Científicas
Madrid, España
ES2103749T3 (01-10-1997)
EP0458918A1 (04-12-1991)
EP0458918B1 (07-05-1997)
WO9109313A1 (27-06-1991)
PCT/ES1990/000043 (14-11-1990)
E90916994 (14-11-1990)
Abstract
EL OBJETIVO DEL METODO ES LA DETECCION DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA MEDIANTE UNA PRUEBA INMUNO ENZIMATICA DONDE LA PRINCIPAL PROTEINA DEL VIRUS (P72) ES UTILIZADO COMO ANTIGENO, DICHA PROTEINA ES OBTENIDA POR MANIFESTACION DEL GENE QUE LA CODIFICA. EL GENE SE IDENTIFICA POR HIBRIDACION CON ENSAYOS OLIGONUCLEOTIDOS DERIVADOS DE LA INFORMACION ESTRUCTURAL DE LA PROTEINA PURIFICADA. UNA VEZ QUE LA SECUENCIA DE NUCLEOTIDOS HA SIDO DETERMINADA, EL GENE ES INSERTADO EN EL VECTOR DE FORMULACION PAR3038 AL OBJETO DE OBTENER EL ASOCIANTE DEL PLASMA PS72A. DICHO PLASMIDO HA SIDO UTILIZADO EN LA TRANSFORMACION DE LA CEPA E.COLI BL21(DE3) QUE, TRAS LA INDUCCION CON IPTG, FAVORECE EL ALTO RENDIMIENTO DE PRODUCCION DE PROTEINA ASOCIANTE P72. LA PROTEINA HA SIDO PURIFICADA POR UNA ELEVADA SOLUCION LIQUIDA CROMATOGRAFICA HABIENDOSE SIDO EMPLEADA DIRECTAMENTE EN ENSAYOS ANTIGENEÑANTICUERPO CON MUESTRAS DE SUERO ANIMAL A FIN DE DIAGNOSTICAR LA ENFERMEDAD.