Characterization of microbial secondary alcohol dehydrogenases for the production of chiral alcohols and ketosteroids and the use of a deep eutectic solvent (des) in the reaction medium

Resum

Una parte de esta Tesis Doctoral trata acerca de la caracterización y purificación de una alcohol deshidrogenasa secundaria y de una colesterol oxidasa obtenidas a partir de bacterias naturales del género Rhodococcus. Las cepas empleadas de este género fueron la GK1, la GK3 y la GK12. Fueron utilizadas para estudiar su capacidad de metabolizar esteroles. Algunos de los pasos que se incluyen en el catabolismo de los esteroles incluye la modificación de la cadena lateral, así como la degradación del núcleo esteroidal. Para obtener derivados de alto valor añadido, se añadieron iones cobalto y níquel al medio de reacción para inhibir la degradación del núcleo esteroidal y obtener derivados como el 4-androsten-3,17-diona (AD) y 1,4-androstadien-3,17-diona (ADD). La otra parte de la Tesis Doctoral trata del uso de Disolventes Eutécticos (DES) con ADHs de diferentes bacterias que fueron sobreexpresadas en céclulas de Escherichia coli (E. coli). Cuando se emplearon concentraciones de las cetonas halogenadas utilizadas como sustratos entre 300-400 mM en estos nuevos disolventes, se obtuvieron excelentes conversiones y excesos enantioméricos. Los mejores resultados fueron obtenidos con las ADHs de Lactobacillus brevis y Rhodococcus ruber. Finalmente, se escalaron algunos de estos procesos obteniendo buenos rendimientos