Péptidos sintécticos de los virus de las hepatitis a y g. Empleo de liposomas como inmunoadyuvantes y como modelos de membrana

Abstract

La presente tesis doctoral se ha estructurado en dos partes diferenciadas. La primera parte se ha estudiado un péptido sintético, de estructura multimérica, el MAP[VP1+VP3], que contiene lugares potencialmente antigénicos de las proteínas virales VP1 y VP3 del virus de la hepatitis A, y en la segunda, péptidos sintéticos correspondientes a la proteína E1 del virus GBV-C/HGV, o virus de la hepatitis G, y su interacción con modelos de membrana. Los principales objetivos de esta primera parte de la tesis doctoral han sido estudiar la capacidad inmunógena del péptido MAP[VP1+VP3] con dos formulaciones distintas que se administraron a animales de experimentación, y valorar las diferencias que se han obtenido en cuanto a términos de avidez y de reconocimiento de epítopos constituyentes de la macromolécula mediante dos técnicas distintas, una técnica de inmunoensayo clásica como es el ELISA, y otra más novedosa como es la basada en la resonancia del plasmón de superficie (RPS). Durante 98 días se siguió un protocolo de inmunización, en el que los conejos 1 y 2 fueron inmunizados con el péptido MAP[VP1+VP3], Al conejo 1 se le administró una formulación con adyuvante de Freund, y al conejo 2 una formulación con liposomas MLV. En el conejo 1 los niveles de anticuerpos totales se mantuvieron elevados hasta la última inmunización, en la que se observó un descenso, quizás debido a un efecto de tolerancia. En el conejo 2 los niveles de anticuerpos fueron creciendo hasta llegar a su punto máximo a los 98 días. En ambos caso se midieron los niveles de anticuerpos al mes de la última inmunización y se observó que en el caso del conejo 1 habían descendido prácticamente hasta desaparecer y no así en el caso del conejo 2. En el análisis de la avidez se utilizaron dos técnicas distintas, el ELISA y tecnología de RPS. En nuestros estudios, las curvas experimentales hechas para calcular la avidez a partir del ELISA, no se ajus