Caracterización de los genes atpolh y atrev1 que codifican polimerasas de sintesis translesión en arabidopsis thaliana

Resumen

Los organismos presentan distintos mecanismos para mantener la estructura y tolerar las lesiones en su ADN permitiendo que la célula pueda completar su ciclo. Uno de estos mecanismos es la síntesis translesión, llevada a cabo principalmente por polimerasas de la familia Y. El objetivo de esta tesis ha sido la identificación de genes pertenencias a dicha familia en Arabidopsis thaliana. Los resultados obtenidos indican que A.thaliana presenta homólogos estructurales y funcionales de las subfamilias RAd30/Pol? Y Rev1, denominados AtPOLH y ArREV1 respectivamente. Ambos genes se encuentran contiguos en el cromosoma V de la planta, y en ambos se ha observado procesamiento alternativo dando lugar a diferentes proteínas. La expresión de AtPOLH en estirpes deficientes de levaduras recupera el fenotipo silvestre tras irradiarlas con luz UV, siendo imprescindible la secuencia SIDE del centro activo y la región carboxi-terminal. La expresión del gen ArTEV1 en estirpes de levaduras deficientes no recupera el fenotipo silvestre debido probablemente a la escasa homología entre Rev1 de A.thaliana y Saccharomyces cerevisiae. La sobreexpresión de AtPOLH en Escherichia coli produce un cambio en el espectro mutacional tras irradiar las células con luz UV. AtPOLH y AtREV1 se expresan en todas las células vivas de la planta a lo largo de todo el ciclo biológico, siendo los órganos reproductivos y los tejidos meristemáticos los que presentan menor expresión. AtREV1 se expresa unas cinco veces más que AtPOLH, y la expresión de ambos no se induce frente a luz visible o luz ultravioleta. El silenciamiento y sobreexpresión de AtREV1 disminuye la tasa de germinación. El silenciamiento de ambos genes y la sobreexpresión de AtPOLH retrasan el desarrollo, mientras que la sobreexpresión de ArREV1 lo induce. Los resultados obtenidos muestran que las plantas superiores presentan mecanismos de síntesis translesión similares a los encontrados en otros organismos.