Desarrollo de vectores de clonación y de un sistema de transformación en Brevibacterium lactofermentum

Resum

La presente memoria describe el desarrollo mediante plasmidos vectores de un sistema de clonacion en corinebacterias. Este sistema se ha realizado sobre un plasmido aislade brevibacterium lactofermentum blo que se denomino pbl1 y tiene un tamaño de 4 4 kb. Debido a que este plasmido es criptico se construyeron distintos plasmidos hibridos con plasmidos vectores de escherichiacoli y de streptomyces que codificaban para resistencias a ampicilina cloranfenicol kanamicina tetraciclina y tioestreptona. Se ha desarrollado un sistema de transformacion de protoplastos de b. Lactofermentum observandose que de todas las resistencias ensayadas unicamente se expresan en b. Lactofertum la resistencia a kanamicina codificada por el trasposon tn5 y la resistencia a cloranfenicol de s. Acrimycini. Este sistema puede emplearse en experimentos de clonacion tanto si se emplean tri o bifuncionales como unifuncionales; lo cual permite pensar en la posibilidad de emplear las corinebacterias como un sistema de clonacion alternativo a e. Coli bacillus y streptomyces.