Pcr-anidada múltiple en el diagnóstico de infecciones neurológicas por virus del grupo herpes

Abstract

Los herpesviurs pueden producir patologia neurologica que requiere diagnostico rapido y fiable, asi como una terapia antiviral especifica. Por tanto, se requieen tecnicas sensibles y especificas adaptadas al diagnostico rapido de infecciones del sistema nervioso por dichos virus, siendo utiles las tecnicas de ampliacion genomica. Nosotros desarrollamos y optimizamos un procedimiento de PCR-anidada multiple para diagnostico de VHS-1,VHS-2, VVZ,VEB y CMV con una mezcla reactiva preparada con antelacion y mantenida a -70ºC, hasta 3 meses. Todo el proceso de amplificacion tuvo lugar en un solo tubo de reaccion y preciso una pequeña cantidad de liquido cefalorraquideo(10 ul). El proceso de extraccion consistio en tres ciclos repetidos de congelacion y descongelacion, tras lo cual 10 ul de muestra se utilizaron directamente para la realizacion de la tecnica. Se detectaron herpesvirus en el 32,40% de pacientes con diagnostico de miningoecefalitis, siendo el VHS-1 el agente etiologico mas frencuente. En pacientes con otras enfermedades neurologicas, la deteccion de herpesvirus vario del 4,65% al 22,22%, según las patologias consideradas. El procedimiento de PCR-anidada multiple desarrollado, es util en el diagnostico etiologico de alteraciones neurologicas de herpevirus, tanto en el caso de meningoencefalitis como de otras patologias