Expresión, regulación y función del plasminógeno durante el proceso de desarrollo neuronal

Résumé

El plasminógeno es una proteasa que se activa por acción específica de dos activadores, el tPA y el uPA, para formar plasmina. Su principal función es la disolución de coágulos de fibrina en la vasculatura. Se sintetiza mayoritariamente en el hígado aunque destaca su patrón de expresión en otros tejidos extrahepáticos como riñón, cerebro o pulmón cuyos mecanismos de regulación se desconocen. Este trabajo de tesis se ha centrado en la caracterización funcional del promotor del Plg murino, definiéndose la región mínima del promotor responsable de su expresión en células hepáticas, así como la identificación de los elementos reguladores y su inducción por IL-6. También se estudiaron los mecanismos de regulación del Plg en células nerviosas y se comprobó que el factor de crecimiento neural (NGF) regula positivamente la expresión del Plg tanto a nivel transcripcional como de proteína. Se definió la región del promotor que media esta regulación por NGF y se identificó como funcional un conjunto de 3 sitios Sp1 en el promotor del Plg, que determina el nivel de transcripción del gen inducido por NGF. Se comprobó que la vía de señalización de Ras/Erk es necesaria para la inducción del gen del plasminógeno por NGF. La síntesis de Plg en distintas áreas del sistema nervioso central y periférico y nuestros datos sobre su regulación por NGF nos llevó a estudiar el papel fisológico del Plg durante el proceso de crecimiento neuronal usando el modelo de neuritogénesis inducida por NGF en células PC-12. Nuestros resultados demuestran que el Plg participa en el proceso de elongación de las neuritas, en concreto a través del dominio proteolítico. Esta elongación se produce porque el Plg se une a la laminina facilitando asi su activación por el tPA y el posterior procesamiento proteolítico de la laminina que le sirve de soporte. Esta es la primera vez que se demuestra que el Plg se regula por NGF y part