Biotransformaciones aplicadas en la síntesis industrial de monómeros precursores de oligonucleótidos antisense

Abstract

Con el reciente éxito de varios oligonucleótidos antisense sujetos a ensayos clínicos en humanos y su posible comercialización, en un futuro próximo será necesario sintetizar grandes cantidades de oligonucleótidos terapéuticas. Por tanto, el desarrollo de métodos para su síntesis a gran escala empieza a ser un asunto urgente. Los precursores claves para la preparación de estos oligonucleótidos son los monómeros nucleosídicos 3' -y/o 5'-protegidos. En esta memoria, estructurada en cuatro capítulos, se ha llevado a cabo la síntesis de nucleósidos 3'- y/o 5'-protegidos a través de reacciones enzimáticas de hidrólisis y acilación. En el primer capítulo, se ha analizado una síntesis práctica y corta de 3' y 5'- O-levulinilnucleosidos mediante la hidrólisis enzimática regioselectiva de los correspondientes derivados 3', 5'-di-O-levulinil, mientras que la lipasa de Pseudomonas cepacia inmovilizada (PSL-C) y la lipasa de Candida antartica A (CAL-A) muestran una selectividad opuesta, catalizando la hidrólisis de la posición 3'. Cabe destacar, que los derivados de citidina y adenosina protegidos en la base no son sustratos adecuados para la hidrólisis enzimática con CAL-B. Los resultados obtenidos han sido publicados en: "Building-Blocks for the solution phase synthesis of oligonucleotides: regioselective hydrolysis of 3',5'-di-O-levulinylnucleosides using an enzymatic approach". J.García, S. Fernández, M. Ferrero, Y. S. Sanghvi y V. Gotor J. Org. Chem. 2002, 67, 4513-4519. "Building blocks for the solution phase synthesis of oligonucleotides". J. García, S. Fernández, M. Ferrero, Y. S. Sanghvi y V. Gotor US2002/0142307. El segundo capítulo describe una nueva concisa estrategia para la síntesis de precursores levulinilo a través de la acilación enzimática regioselectiva de nucleósidos protegidos en la base, solucionándose las limitaciones del método de hidrólisis. Este método mejorado es un protoc