Aislamiento y caracterización del gen estructural de la carboxipeptidasa s de saccharomyces cerevisiae regulación de su expresión
- M. Paz Suarez Rendueles Director
Defence university: Universidad de Oviedo
Year of defence: 1993
- Santiago Gascon Muñoz Chair
- Rosaura Rodicio Rodicio Secretary
- Manuel González Carrero Committee member
- Isabel López Calderón Committee member
- Francisco Portillo Pérez Committee member
Type: Thesis
Abstract
EL OBJETO DEL TRABAJO HA CONSISTIDO EN EL AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DEL GEN DE UNA PROTEASA VACUOLAR DE S. CEREVISIAE. HA SIDO AISLADO SU GEN ESTRUCTURAL POR COMPLEMENTACION FUNCIONAL. SE HA REALIZADO LA CARACTERIZACION DEL MISMO. ASI, SE HA LOCALIZADO EN EL CROMOSOMA X DE LA LEVADURA, SE HA IDENTIFICADO SU ARN MENSAJERO DE 2,1 KB Y SE HA CONSTRUIDO UN MUTANTE NULO SUSTITUYENDO EN UNA CEPA SALVAJE LA COPIA GENOMICA POR OTRA DELECIONADA. SE HA REALIZADO LA SECUENCIACION DEL GEN CON UN TAMAÑO DE 1728 PARES DE BASES Y QUE CODIFICA A UNA PROTEINA DE 576 AMINOACIDOS Y 64500 DA. MEDIANTE ANALISIS WESTERN SE HAN DETECTADO 3 BANDAS DE PROTEINA DE 76, 74 Y 73 KDA. SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION DEL GEN EN DIFERENTES SITUACIONES METABOLICAS. ESTA EXPRESION ESTA SOMETIDA A REPRESION POR NITROGENO Y SOLO SE PRODUCE LA DESREPRESION EN PRESENCIA DE UNA FUENTE DE CARBONO FACILMENTE FERMENTABLE COMO GLUCOSA O FRUCTOSA, ELEVANDOSE MAS DE 10 VECES LOS NIVELES DE TRANSCRICION DEL GEN. POR ULTIMO, SE HA IDENTIFICADO UNA REGION DEL PROMOTOR RESPONSABLE DE LA REPRESION POR NITROGENO ENTRE -644 Y -591 PARES DE BASES EN RELACION AL ATG INICIADOR.