Caracterización de una región del cromosoma de streptomyces antibioticus implicada en la biosíntesis y resistencia a oleandomicina

Resumen

A PARTIR DE UNA GENOTECA DE STREPTOMYCES ANTIBIOTICUS, SE SELECCIONO EL CLON COSAB35 COMO POSIBLE PORTADOR DE AL MENOS PARTE DE LA RUTA DE BIOSINTESIS DEL ANTIBIOTICO OLEANDOMICINA. EN ESTE CLON SE SECUENCIO, EN PRIMER LUGAR, UNA REGION DE 11,5 KB QUE HIBRIDABA CON GENES DE BIOSINTESIS DE OTROS ANTIBIOTICOS MACROLIDOS. EL ANALISIS DE ESTA SECUENCIA PERMITIO DETECTAR DOS PAUTAS ABIERTAS DE LECTURA: ORF1 (INCOMPLETA) Y ORF2 (COMPLETA). EL PRODUCTO GENICO DEDUCIDO A PARTIR DE LA ORF2 MOSTRABA GRAN HOMOLOGIA CON POLIQUETIDO SINTETASAS TIPO I Y ESTA ENZIMA POSIBLEMENTE LLEVE A CABO LA SINTESIS DEL ANILLO LACTONA DE LA OLEANDOMICINA. ESTE GEN (ORF2) NO PRESENTA UN CONTENIDO EN GC TOTAL NI UN USO DE CODONES TIPICO DE LOS GENES DE STREPTOMYCES. SU % GC EN LA TERCERA POSICION DE CADA CODON ES EL MAS BAJO CONOCIDO PARA UN GEN DE STREPTOMYCES. EL PORCENTAJE DE CODONES TERMINANDO EN T (20,2%) ES MUY SUPERIOR AL DE LOS GENES DE STREPTOMYCES (3,6%) Y ELLO VA ACOMPAÑADO DE UNA DISMINUCION DE CODONES TERMINANDO EN C. EN SEGUNDO LUGAR, SE SECUENCIO OTRA REGION DEL CLON COSAB35, LA CUAL CONFERIA RESISTENCIA A OLEANDOMICINA. EL ANALISIS DE ESTA SECUENCIA PERMITIO DETECTAR DOS PAUTAS ABIERTAS DE LECTURA QUE SE TRANSCRIBIAN EN SENTIDOS OPUESTOS Y CONVERGENTES: OLEP (ES UN CITOCROMO P450) Y OLEB (ES UN ABC TRANSPORTADOR).