Mecanismos de modulación de los canales erg y su relación con las variaciones de actividad eléctrica y ca2* intracelular en células adenohipofisarias

Résumé

El objetivo general de esta Tesis ha sido el estudio de los componentes y los mecanismos de regulación de la cascada de acoplamiento estimulo-secreción de las celulas adenohipofisarias en respuesta a la hormona liberadora de tirotropina (TRH). De un modo más concreto, el trabajo se ha centrado en dos objetivos principales: a) el estudio de la modulación de los canales de K+ erg que participan en la regulación de la actividad electrica de las celulas adenohipofisarias por la TRH, y b)la correlación en celulas individuales de la actividad electrica y variaciones de Ca2+ citosólico, asi como el estudio de los distinos mecanismos que median la producción de oscilaciones del cation en celulas GH3. Nuestros resultados demuestran que en células HEK 293 que expresan el canal humano h-erg y el receptor de TRH la regulación de este canal por la hormona incluye una reducción en la magnitud de la corriente, un desplazamiento de la dependencia de voltaje de activación hacia valores mas positivos, una ralentización de la apertura y una aceleración del cierre. Además, la activación de los receptores muscarínicos endógenos en estos celulas induce efectos similares pero de menor magnitud que los causados por la TRH sobre h-erg. En cuanto a los componentes moleculares impliados en la cascada de señalización de la TRH, nuestros resultados demuestran que, si bien h-erg puede ser regulado por la PKC, esta quinasa no parece estar implicada en los mecanismos de regulación hormonal de este canal. Asimismo, ni la PKA ni la calcio-calmodulina quinasa participan en la cascada de señalización acoplada al receptor de TRH en estas células. Por otro lado, el mecanismo de regulación de h-erg por la TRH parece ser ejercida a traves de mecanismos analogos en celulas HEK 293 y en celulas adenohipofisarias. Sin embargo, parecen existir diferencias en los mecanismos de regulacion de los canales erg por los distintos receptores hormonales y agentes farm