Biosensores amperométricos basados en deshidrogenasas dependientes de nad+/nadh

Abstract

SE PROPONE EL USO DE ELECTRODOS DE PASTA DE CARBONO MODIFICADOS COMO BIOSENSORES AMPEROMETRICOS PARA SUSTRATOS DE DESHIDROGENASAS DEPENDIENTES DE LOS COENZIMAS NAD+/ NADH. SE HAN DESARROLLADO Y EVALUADO DOS TIPOS DE ELECTRODOS MODIFICADOS PAR ALA DETECCION ELECTROCATALITICA DEL NADH GENERADO ENZIMATICAMENTE: ELECTRODOS QUE UTLIZAN MEDIADORES DE TRANSFERENCIA DE CARGA MONOMEROS DISPERSOS EN PASTA DE CARBONO E INMOVILIZADOS MEDIANTE MEMBRANAS DE ACETATO DE CELULOSA Y ELECTRODOS MODIFICADOS CON POLIMEROS CONDUCTORES. SE HA DESCRITO POR PRIMERA VEZ EL EFECTO CATALITICO DE LOS POLIMEROS CONDUCTORES POLI (O-AMINOFENOL) (PAP) Y POLI (O-FENILENDIAMINA) (PPD) SOBRE LA OXIDACION ELECTROQUIMICA DEL NADH Y SE HA UTILIZADO ESTE EFECTO PARA LA TRANSDUCCION AMPEROMETRICA DEL PROCESO ENZIMATICO A POTENCIALES APLICADOS PROXIMOS A OV. EL PROCESO CATALITICO PRESENTA UN MECANISMO DE TIPO CE E INVOLUCRA PROBABLEMENTE LA ADSORCION PREVIA DEL NADH REACCIONANTE SOBRE EL POLIMERO CONDUCTOR, SE HAN DETERMINADO LAS CONDICIONES OPTIMAS PARA LA ELECTROGENERACION DEL POLIMERO Y SE HA DEMOSTRADO QUE LAS CARACTERISTICAS ANALITICAS DE ESTOS ELECTRODOS POLIMERICOS SON MUY SUPERIORES A LAS DE LOS ELECTRODOS QUE UTILIZAN MEDIADORES MONOMEROS COMO EL COLORANTE FENOTIACINICO AZUL DE TOLUIDINA O. LOS ELECTRODOS MODIFICADOS CON PPD PRESENTAN RESPUESTAS AMPEROMETRICAS AL NADH LINEALES ENTRE 10-8MY 2X10-7M CON LIMITES DE DETECCION DE 1X10-9M Y UNA VIDA UTIL SUPERIOR A LOS 15 DIAS Y MAS DE 200 DETERMINACIONES. ADEMAS, LAS PELICULAS DEL PPD ACTUAN COMO BARRERAS MUY EFICACES E IMPIDEN LA DIFUSION DE LOS BIORREACTIVOS (NAD+ Y ENZIMAS) INMOVILIZADOS POR DISPERSION EN PASTA DE CARBONO, AL TIEMPO QUE CONSERVAN SU ACTIVIDAD ELECTROCATALITICA PARA LA OXIDACION DEL NADH. SE HAN DESARROLLADO Y EVALUADO SENSORES DE ETANOL Y LACTATO BASADOS EN ESTE DISEÑO, QUE SE HAN APLICADO A LA DETERMINACION DE AMBOS COMPUESTOS EN BEBIDAS CON RESULTADOS CONCORDANTES CON LOS METODOS ENZIMATICO