Aislamiento y caracterización de actinomicetos asociados a hormigas de la tribu Attini

  1. Sialer Guerrero, Carlos Alberto
Supervised by:
  1. José Antonio Salas Fernández Director
  2. Mª del Carmen Méndez Fernández Director

Defence university: Universidad de Oviedo

Fecha de defensa: 05 July 2011

Committee:
  1. Juan Evaristo Suárez Chair
  2. Gloria Blanco Lizana Secretary
  3. Ramón Santamaría Sánchez Committee member
  4. Miguel Ángel Álvarez González Committee member
  5. María Enriqueta Arias Fernández Committee member
Department:
  1. Biología Funcional

Type: Thesis

Teseo: 311155 DIALNET lock_openRUO editor

Abstract

Al igual que las hormigas los actinomicetos son organismos muy abundantes y cumplen un papel ecológico importante. Comúnmente aislados desde el suelo y organismos acuáticos, se encuentran entre las bacterias más interesantes, ya que juegan un rol importante en la biodegradación en el suelo y producen una gran parte de los antibióticos naturales usados actualmente en clínica. Actualmente otra fuente interesante de asilamiento lo constituyen las hormigas cortadoras de hojas y dentro de estas las de la especie Acromyrmex octospinosus de cuyos nidos, 4 en total, recolectamos muestras en el departamento de Lambayeque en Perú. Un total de 197 actinomicetos fueron aislados creciendo en medio MA y R5A, de los cuales seleccionamos 99. Obtuvimos sus DNA cromosómicos, y haciendo uso de los cebadores universales pA y pH amplificamos por PCR una región de 1500pb, el 16S rDNA el cual incluye la región gamma. Estas secuencias fueron alineadas y comparadas con bases de datos públicas, demostrando que 96 de estas cepas pertenecían al género Streptomyces, 2 al género Prauseria y 1 al género Nocardia. Los ensayos de bioactividad de los extractos de estas 99 cepas mostraron ser activos frente a bacterias Gram positivas (78%), Gram negativas (41%), alcohol acido resistentes (25%), levaduras (19%) y líneas celulares tumorales (24%), presentando algunos de ellos un amplio espectro de acción. Por medio de técnicas de dereplicación y bioconversión logramos reconocer y generar dos nuevos compuestos análogos a la colismicina A. Los cuales se diferenciaron de la molécula original por tener una metilación en la posición 4 y 6 del anillo bencénico principal y las denominamos colismicina M4 y colismicina M6, los cuales además mostraron actividad citotóxica y neuroprotectora en ensayos realizados en pez cebra luego de haber inducido la apoptosis neuronal con ácido retinoico.